Post by alamin447 on Aug 3, 2023 0:30:57 GMT -5
以去除任何非特异性结合的 Au-PEG-AD。使用 Zeiss LSM 510 共焦扫描显微镜（配有 Plan-Neofluar ×40/0.75 物镜和高达 2 倍数字变焦）来收集图像（DAPI 激发：740 nm（双光子激光），发射滤光片：390–490 nm；Au-PEG-AD 激发：488 nm（氩激光），发射滤光片：带通 (BP) 500–550 nm 红外辐射（IR） ））。采集图像的实测分辨率为 512 × 512 像素，图
像位深为 8 位。Zeiss LSM 图像图像。 RNA提取 将保Telegram 用户号码列表存在 RNALater (Ambion) 中的患者样本悬浮在 TRIzol 试剂 (Invitrogen) 中，并在 FastPrep-24 组织匀浆器 (MP Biomedicals) 中匀浆。按照制造商的建议，使进行第二轮巢式 PCR。PCR产物在2%琼脂糖凝胶上运行并用1μgμl -1溴化乙锭染色。从凝胶中切下 PCR 产物并直接测序以
确认 RACE 条带身份。对于细胞培养 RACE 实验，用 20 nM RRM2转染 500,000 个 HT-144 黑色素瘤细胞使用 Lipofectamine RNAiMax (Invitrogen) 进行 siRNA。如前所述，转染后 48 小时提取 RLM-RACE 的 RNA。 实时荧光定量PCR 使用 SuperScriptIII 逆转录酶对患者 RNA 样本进行逆转录。白细胞 (WBC) cDNA (0.4–200 ng) 用作RRM2和TBP标准曲线的 PCR 模板。两微升